梅里埃 20900棒狀桿菌鑒定試劑盒API Coryne

鏈球菌及相關(guān)微生物鑒定試劑盒（比色法） 說明書

【產(chǎn)品名稱】 通用名稱：鏈球菌及相關(guān)微生物鑒定試劑盒（比色法） 英文名稱：API 20 Strep

【包裝規(guī)格】 25 測試/盒

【預(yù)期用途】 本產(chǎn)品用于測定鏈球菌（streptococci）、腸球菌(enterococci)和其它相關(guān)細菌的種或群鑒定。 臨床常見樣本來源有泌尿生殖道標本、呼吸道標本、血。該系統(tǒng)能鑒定的菌譜名單列于說明書后的鑒定表中。

【檢驗原理】 API 20 Strep 試條由 20 個含干燥底物的微量小管組成，能檢測酶活性或糖的發(fā)酵。 酶活性測定是以由純培養(yǎng)制成的濃菌懸液接種于含干燥的酶底物的微量小管中，使管內(nèi)的底物溶解。在 培養(yǎng)期間，所產(chǎn)生的最終代謝產(chǎn)物通過自然反應(yīng)或加入附加試劑而變色。 發(fā)酵試驗是接種于由含糖底物組成的培養(yǎng)基中。發(fā)酵的碳水化合物通過 pH 指示劑顏色的改變來檢測。 鑒定結(jié)果可根據(jù)說明書的判讀表讀出，也可參照生化檢索手冊或鑒定軟件，得到鑒定結(jié)果。

【主要組成成分】 試劑盒組成(用于 25 個測試) - 25 個 API 20 Strep 試條 - 25 個 孵育盒 - 25 個 API GP 培養(yǎng)基安瓿 - 25 張結(jié)果報告單 試劑條成分 API 20 Strep 試條的成分請參閱說明書后的結(jié)果判讀表。 培養(yǎng)基 API GP 培養(yǎng)基 2 mL L-胱氨酸 0.5 g 胰蛋白胨 (牛源/豬源) 20 g 氯化鈉 5 g 亞硫酸鈉 0.5 g 酚紅 0.17 g 去離子水 加至 1000 mL pH : 7.4 - 7.6 說明書中的量可能因使用原材料滴度的變化有所調(diào)整。 鏈球菌及相關(guān)微生物鑒定試劑盒（比色法） 版本號 07625L-zh– 2010/07 2 需要但沒有提供的試劑和設(shè)備 試劑/儀器： - API○R 懸浮培養(yǎng)基， 2 mL (Ref. 70 700) - 試劑： NIN (Ref. 70 491) VP 1 + VP 2 (Ref. 70 422) ZYM A (Ref. 70 494) ZYM B (Ref. 70 493) - 礦物油 (Ref. 70 100) - McFarland 標準比濁管 (Ref. 70 900) MCF 4 或光度計 DENSIMAT (Ref. 99 234) - API 20 Strep 數(shù)值分析索引 (Ref. 20 690)或鑒定軟件 (請于生物梅里埃公司聯(lián)系） - 哥倫比亞血瓊脂平板 (Ref. 43 041) - Schaedler 肉湯培養(yǎng)基 (選用) 材料： - 拭子 - 吸管或 PSI 管 - 安瓿架 - 安瓿保護套 - 厭氧瓶 - 微生物實驗室常規(guī)設(shè)備

【儲存條件及有效期】 2～8°C 保存，有效期為 12 個月。 生產(chǎn)日期：詳見外包盒標簽。 失效日期：詳見外包盒標簽。

【適用儀器】 - McFarland 標準比濁管 (Ref. 70 900) MCF 4 或光度計 DENSIMAT (Ref. 99 234) - API 20 Strep 數(shù)值分析索引 (Ref. 20 690) 或 鑒定軟件 (請于生物梅里埃公司聯(lián)系）

【樣本要求】 API 20 Strep 不能直接用于臨床或其他標本（例如泌尿生殖道標本、呼吸道標本、血標本等等）。 需要鑒定的微生物必須首先根據(jù)微生物標準規(guī)程在合適的培養(yǎng)基上進行分離。

接種物的制備 

? 按產(chǎn)品說明書中“警告和注意"所示，打開 API 懸浮培養(yǎng)基安瓿。

? 用拭子收集所有先前準備好的傳代平板上的細菌。建議使用培養(yǎng) 24-48 小時的新鮮菌。.

? 制備菌懸液，濃度為 6 個麥氏單位。菌懸液制備好后應(yīng)立即使用。

試條的接種 

? 試條前 11 個試驗 (從 NIT 到 GEL ) 加入菌懸液， 注意避免氣泡 (將培養(yǎng)盒稍前傾，吸管和 PSI 管的吸頭

靠住杯的內(nèi)緣，菌懸液沿管壁滴入杯內(nèi)。) ：

- 從 NIT 到 ESC：每個杯中加入約 100-150 µl 菌懸液。

- URE ：只加滿管的部分

- GEL ：管和杯都加滿

? 試條最后 9 個試驗 (從 0 到 GLYG)：

- 按產(chǎn)品說明書中“警告和注意"所示，打開一支 API GP 培養(yǎng)基，倒入余下的菌懸液(約 0.5 ml)。混合均

勻。

- 將新的菌懸液加入每個小管中（只加管部）

? 在有下劃線的試驗的杯中(URE, 和 0 到 GLYG) 加入礦物油，形成新月狀凸起。

? 蓋上蓋子

? 在有氧環(huán)境中，36°C ± 2°C 孵育 24 小時(? 2 小時) 

試條判讀

孵育后：

? 加入試劑：

- NIT 試驗：各加一滴 NIT 1 和 NIT 2

- PYZ 試驗：加入 1 滴 PYZ

- PyrA,PAL,?GUR,?GAL,?GLU 和 ?NAG 試驗：各加一滴 ZYM A 和 ZYM B （*）

- 等待 10 分鐘，然后根據(jù)判讀表讀所有的結(jié)果。如有必要，讓試條暴露在強光下 (1000 W) 10 秒鐘，使 PyrA

到 ?NAG 管內(nèi)多余試劑退色。

（*）建議在使用前控制每個 ZYM B 安瓿。

為了消除任何缺陷試劑，建議按照質(zhì)控章節(jié)所述應(yīng)用 ATCC○R27402 菌株進行質(zhì)量控制檢測。

? 進行觸酶試驗 (作為第 21 測試)：在 ESC 或 GEL 測試中加入一滴過氧化氫 (3 %) ，等一分鐘。產(chǎn)生氣泡

即為陽性。

? 將結(jié)果記錄到結(jié)果報告單上

? API Coryne 系統(tǒng)只應(yīng)用于包括在數(shù)據(jù)庫內(nèi)的棒狀桿菌屬或相關(guān)的屬的鑒定（參說明書末的鑒定表）。不能

用於鑒定或排除鑒定范圍之外的菌種。產(chǎn)品數(shù)據(jù)庫僅限于臨床標本中最常見的棒狀桿菌。

? 此方法只能用于單個細菌的純培養(yǎng)物的鑒定。

? 某些情況下， API Coryne 試條的生化反應(yīng)不足以鑒別兩種菌時，必須進行補充試驗，這種情況會出現(xiàn)一個注

解。在分析圖譜索引和技術(shù)手冊的 "鑒定軟件相關(guān)生化信息"內(nèi)有試驗說明和文獻參考。

? 如果細菌鑒定為白喉棒狀桿菌（C. diphtheriae）, 必須做過敏毒素試驗確定該菌株為致病菌。