梅里埃API細菌鑒定試劑盒使用操作方法

梅里埃API試劑盒細菌鑒定試劑盒種類如下：

（注）：每種試劑盒都需要相關配套試劑才能使用。

梅里埃API細菌鑒定試劑盒使用操作方法：

例：腸桿菌和其他非苛養革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒（比色法）

【預期用途】
該產品用于腸桿菌和其它非苛養革蘭氏陰性桿菌的鑒定。
該產品用于可導致腹瀉、血流感染、尿路感染等的腸桿菌和其它非苛養革蘭氏陰性桿菌的鑒定，臨床常見樣本來源有糞便、直腸拭子、尿、血等。
【檢驗原理】
API 20 E 試條由 20 個含干燥底物的微量小管組成。將菌懸液接種到管內，使小管內底物溶解。孵育過程中，所產生的代謝產物通過自發反應或加入附加試劑后而變色。鑒定結果可根據說明書的判讀表進行讀出，也可參照生化譜檢索手冊或鑒定軟件，得到鑒定結果。
【主要組成成分】
試劑盒組成（用于 25 個敏感性測試）
- 25 個 API 20 E 試條
- 25 個孵育盒
- 25 張結果報告單
- 1 個封口夾
試劑盒組成（用于 100 個敏感性測試）
- 100 個 API 20 E 試條（4x25 試條）
- 100 個孵育盒
- 100 張結果報告單
- 1 個封口夾
試劑條成分

API 20 E 試條的成分請參閱說明書后的結果判讀表。

【檢驗方法】
氧化酶試驗：
必須按照制造商的使用說明進行氧化酶試驗。由于它是最終圖譜的組成部分，請將其結果記錄于報告單上（第二十一個試驗）。
試條的準備：
1.準備一個培養盒（盤和蓋子），倒入約 5mL 蒸餾水或軟化水【或其它不含添加劑或不含有能產生揮發性氣體（如 Cl2, CO2,等）的化學物質的水】于盤的蜂窩小凹中，造成一個濕室。
2.在盤的長邊寫上菌株號(不要寫在蓋上，因為操作過程中很容易將蓋子放到其它試條上）
3.從包裝中取出試條。

4.將試條置于培養盒中。
注意：API 20 E 只能用于腸道細菌和或非苛養的革蘭陰性桿菌。苛養菌由于對營養有特殊要求并且需要合適的防護措施(例如布魯氏菌屬 Brucella 和法朗西絲菌屬 Francisella)，這些菌沒有包括在 API 20 E 數據庫中。 必須采用其它方法，來排除或確認這些菌的存在。
接種物的準備
 根據“警告及注意"一欄所列方法打開一安瓿 API 0.85% NaCl 培養基（5mL)或一安瓿 API 懸浮培養(5mL), 或用含 5mL 0.85 NaCl 鹽水或不含添加劑的無菌蒸餾水。
 用吸管或 PSIpette 從分離平板上挑取單個分純菌落至懸浮基物中。建議使用新鮮培養物（18-24小時）。 仔細研勻以達到均一的細菌懸液。
制備好的菌懸液必須立即使用。
注意：大多數弧菌（Vibrio)均嗜鹽，如懷疑菌株為弧菌，請使用 0.85% NaCl (5mL)培養基。
試條的接種
 用同一根吸管，將菌懸液加入到試條的小管內。為避免在小管的基底部形成氣泡，請將試條輕微向前
傾斜并把吸管或者 PSI 管緊靠小杯邊緣加入菌液）：
- CIT、VP 和 GEL 小管，菌液需充滿的管部和杯部。
- 其它管僅充滿管部(不是杯部)。
- 在試驗 ADH, LDC, ODC, H2S 和 URE 小杯內加入礦物油以形成厭氧環境。
 蓋上培養盒。于 36℃±2℃孵育 18~24 小時。
【陽性判斷值】
請參考本說明書后的“反應鑒定表"，表中列出了各種生化反應預期結果范圍。
【檢驗結果的解釋】
試條的判讀
 孵育后，根據判讀表表判讀各反應結果。
 如果 3 個或 3 個以上測定（GLU 試驗+或-)為陽性結果，記錄所有自發反應于結果報告單上并觀察需要

附加試劑的試驗的結果：
- TDA 試驗：加 1 滴 TDA 試劑。深褐色為陽性反應，記錄于報告單上。
- IND 試驗：加 1 滴 JAMES 試劑。整個反應管出現粉紅色者為陽性，記錄于報告單上。
- VP 試驗：加 1 滴 VP 1 和 1 滴 VP 2 試劑。至少等待 10 分鐘，出現粉紅或紅色者表明為陽性結果，記錄于報告單上。如淺粉紅色在 10 至 12 分鐘內出現，判斷結果為陰性。
注意：吲哚產生試驗必須最后進行，因為該反應釋放的氣體產物會千擾試條的其他試驗。在加入附加試劑后，請小心勿調換培養盒蓋。
 如果加入附加試劑前陽性結果（包括 GLU 試驗）的數量少于 3 個：
- 重新培養 24 小時（土 2 小時），且不要加任何試劑。
- 重新進行需要加入附加試劑的試驗（如前說明）。
- 為了完成鑒定，可能需要進行補充試驗（參考有關鑒定的段落）。